Trizol試劑是直接從細(xì)胞或組織中提取總RNA的試劑。在樣品的裂解液或勻漿中，Trizol能保持RNA的完整性。加入氯/仿(CHCl3)后離心，樣品能分成水樣層和有機(jī)層。而RNA存在于水樣層中。在收集上面的水樣層后，RNA可以通過異丙醇沉淀的方法來還原。在除去水樣層之后，樣品中的核酸和蛋白也能相繼以沉淀的形式還原。乙醇沉淀能析出中間層的DNA，在有機(jī)層中加入異丙醇能析出有機(jī)層的蛋白。
生成沉淀法。例如NaCl 溶液里混有少量的MgCl2 雜質(zhì)，可加入過量的NaOH 溶液，使Mg2+離子轉(zhuǎn)化為Mg(OH)2 沉淀（但引入新的雜質(zhì)OH–），過濾除去Mg(OH)
由于凝膠層析的分離原理是分子篩作用，它不象其它層析分離方式主要依賴于溶劑強(qiáng)度和選擇性的改變來進(jìn)行分離，在凝膠層析中流動(dòng)相只是起運(yùn)載工具的作用，一般不依賴于流動(dòng)相性質(zhì)和組成的改變來提高分辨率，改變洗脫液的主要目的是為了消除組分與固定相的吸附等相互作用，所以和其它層析方法相比，凝膠層析洗脫液的選擇不那么嚴(yán)格。
標(biāo)準(zhǔn)品是標(biāo)記免疫分析定量的依據(jù)。標(biāo)準(zhǔn)品的正確與否直接影響樣品的測定結(jié)果。如果在連續(xù)測定中，或各實(shí)驗(yàn)室之間使用的標(biāo)準(zhǔn)品不一致，則可影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性。為此，對(duì)標(biāo)記免疫分析所使用的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)滿足如下要求。
蛋白質(zhì)溶液用透析除鹽時(shí)，正負(fù)離子透過半透膜的速度不相同，如(NH4)2SO4中的?透析速度快，而透析過程中膜內(nèi)的?會(huì)生成H2SO4，使膜內(nèi)蛋白質(zhì)溶液呈酸性。因此，為避免蛋白質(zhì)變性，用鹽析法純化蛋白質(zhì)時(shí)，開始時(shí)應(yīng)用0.1mol/L的NH4OH透析。此外，為了保證蛋白質(zhì)在透析過程中不發(fā)生變性，可以將透析過程置于低溫下進(jìn)行。
降解問題是RNA制備中常常到的問題。因?yàn)樵?RNA 提取過程中，樣品儲(chǔ)存不當(dāng)或裂解效率低等情況都會(huì)導(dǎo)致降解。對(duì)于 DNA 提取，降解不是一個(gè)大問題，因?yàn)閷?duì)于 PCR，DNA 可以被剪切并且工作正常，如果不希望有較多剪切的 DNA，可以使用弱裂解的方法。
PCR技術(shù)問世于上世紀(jì)80年代。問世之初的PCR體系比較大，動(dòng)輒以毫升計(jì)。現(xiàn)在的PCR體系要精巧多了，總體積可大可小。我們常接觸到的常規(guī)PCR以及熒光定量PCR的體系一般都在幾十微升，小到可以10微升左右。
培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境，培養(yǎng)基種類很多。
DNA片段瓊脂糖凝膠電泳的原理與蛋白質(zhì)的電泳原理基本相同，DNA分子在高于其等電點(diǎn)的pH溶液中帶負(fù)電荷，在電場中向正極移動(dòng)。DNA分子在電場中通過介質(zhì)而泳動(dòng)，除電荷效應(yīng)外，凝膠介質(zhì)還有分子篩效應(yīng)，與分子大小及構(gòu)想有關(guān)。
不同熒光基團(tuán)的熒光強(qiáng)度是有高有低的，例如FAM就是一個(gè)熒光強(qiáng)度相對(duì)較高的基團(tuán)，我們偏向于將其安排給相對(duì)表達(dá)量比較低的目的基因，而熒光強(qiáng)度相對(duì)較低的基團(tuán)可以用于檢測表達(dá)量比較高的如看家基因等，這樣會(huì)達(dá)到擴(kuò)增曲線平臺(tái)期接近的目的，結(jié)果會(huì)比較美觀。
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