與Southern或Northern雜交方法類似，但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測(cè)物是蛋白質(zhì)，“探針”是抗體，“顯色”用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過(guò)PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品，轉(zhuǎn)移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)。既可以定性，又可以半定量的Western是初步鑒定蛋白質(zhì)最方便也是最通用的方法。
細(xì)菌的芽胞具有厚而致密的壁，透性低，不易著色，若用一般染色法只能使菌體著色而芽胞不著色（芽孢呈無(wú)色透明狀）。芽孢染色法就是根據(jù)芽孢既難以染色而一旦染上色后又難以脫色這一特點(diǎn)而設(shè)計(jì)的。所有的芽孢染色法都基于同一個(gè)原則：除了用著色力強(qiáng)的染料外，還需要加熱，以促進(jìn)芽孢著色。當(dāng)染芽孢時(shí)，菌體也會(huì)著色，然后水洗，芽孢染上的顏色難以滲出，而菌體會(huì)脫色。然后用對(duì)比度強(qiáng)的染料對(duì)菌體復(fù)染，使菌體和芽孢呈現(xiàn)出不同的顏色，因而能更明顯地襯托出芽孢，便于觀察。
牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等電點(diǎn)4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽(yáng)離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。牛血清蛋白溶液可以作為測(cè)量蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線用。
注意觀察液滴落點(diǎn)周圍溶液顏色變化。開(kāi)始時(shí)應(yīng)邊搖邊滴，滴定速度可稍快（每秒3~4滴為宜），但是不要形成水流。接近終點(diǎn)時(shí)應(yīng)改為加一滴，搖幾下，最后，毎加半滴，即搖動(dòng)錐形瓶，直至溶液出現(xiàn)明顯的顏色變化，準(zhǔn)確到達(dá)終點(diǎn)為止。
自然界中，質(zhì)粒是在營(yíng)養(yǎng)充足時(shí)出現(xiàn)的，它在結(jié)構(gòu)、大小、復(fù)制方式，每個(gè)細(xì)菌的拷貝數(shù)，在不同的細(xì)菌體內(nèi)的繁殖力不同，在菌種之間的轉(zhuǎn)移力等方面都會(huì)變化，可能最重要的是質(zhì)粒所攜帶的特征的改變。大多數(shù)原核生物的質(zhì)粒是雙鏈環(huán)狀的DNA分子；但是無(wú)論是在革蘭氏陽(yáng)性還是陰性菌體內(nèi)都可以發(fā)現(xiàn)線狀質(zhì)粒。質(zhì)粒大小變化很大，可從幾個(gè)到數(shù)百個(gè)kb。
由于貼壁細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，接觸抑制，長(zhǎng)滿一瓶后貼壁較緊，不易取出。這時(shí)必須用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶處理，使其分散開(kāi)后取出，然后在放入新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
當(dāng)細(xì)胞所處溫度低于0°C時(shí)，細(xì)胞脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶，冰晶的大小對(duì)細(xì)胞的影響是不同的，大冰晶容易造成細(xì)胞膜、細(xì)胞器的損傷和破裂，故造成復(fù)蘇出來(lái)的細(xì)胞存活率、狀態(tài)等與凍存前的狀態(tài)相差甚遠(yuǎn)。因此，我們?cè)趦龃婕?xì)胞的時(shí)候會(huì)采取兩個(gè)措施，一加入低溫保護(hù)劑，二，慢凍細(xì)胞。
目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基滅菌后會(huì)放置水浴或者烘箱中，需使用的時(shí)候拿出來(lái)直接倒板。但培養(yǎng)基靜置時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，靜置時(shí)間一般不超過(guò)4小時(shí)。靜置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，培養(yǎng)基中瓊脂可能會(huì)少量凝固，形成類似絮狀析出。
免疫熒光（Immunofluorescence,IF）原理免疫熒光技術(shù)是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)。它是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理，先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光基團(tuán)，再用這種熒光抗體（或抗原）作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原（或抗體）。利用熒光顯微鏡可以看見(jiàn)熒光所在的細(xì)胞或組織，從而確定抗原或抗體的性質(zhì)和定位，以及利用定量技術(shù)（比如流式細(xì)胞儀）測(cè)定含量。
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