將所需的培養(yǎng)基,胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺(tái)面內(nèi),點(diǎn)燃酒精燈,將培養(yǎng)基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再將瓶口對(duì)準(zhǔn)在酒精燈上消毒2-3次,旋開(kāi)瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋,分別放于酒精燈的兩側(cè)。特別是將培養(yǎng)基瓶放于斜架上,瓶口對(duì)準(zhǔn)酒精燈,且放在距離酒精燈最近的位置,瓶蓋置于酒精燈的另一側(cè)。
生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)基上的霉菌菌絲可分為三部分:①營(yíng)養(yǎng)菌絲:深入的培養(yǎng)基內(nèi),吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的菌絲;②氣生菌絲:營(yíng)養(yǎng)菌絲向空中生長(zhǎng)的菌絲;③繁殖菌絲:部分氣生菌絲發(fā)育到一定階段,分化為繁殖菌絲,產(chǎn)生孢子。
嚴(yán)格進(jìn)行動(dòng)物皮膚消毒,使用三套器械取材。新生動(dòng)物皮膚先用2%碘酒液消毒,成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。
微生物實(shí)驗(yàn)室及無(wú)菌操作臺(tái)開(kāi)紫外燈滅菌1小時(shí),關(guān)閉后至少半小時(shí)才進(jìn)入無(wú)菌室,我們一般1小時(shí)后才進(jìn)去。因?yàn)樽贤鉄粽丈浜笥袣埩簟?/p>
革蘭染色法是細(xì)菌學(xué)中最廣泛使用的一種鑒別染色法。1884 年 由丹麥醫(yī)師 Gram 創(chuàng)立。方法是先將細(xì)菌用結(jié)晶紫染色,加媒染劑(增加染料和 細(xì)胞的親和力)后,用脫色劑(酒精或丙酮)脫色,再用復(fù)染劑染色。如果細(xì)菌 不被脫色而保存原染液顏色者為革蘭陽(yáng)性菌(G+);如被脫色,而染上復(fù)染液的顏 色者為革蘭陰性菌(G-)。此染色法可將所有具有細(xì)胞壁的細(xì)菌分為兩大類:革蘭 陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌。
盡管擴(kuò)增序列的殘留污染大部分是假陽(yáng)性反應(yīng)的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)是謹(jǐn)慎認(rèn)真,在樣品的收集、抽提和擴(kuò)增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意
熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種技術(shù)手段。它通過(guò)在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來(lái)顯示DNA產(chǎn)物的累積情況,從而達(dá)到對(duì)PCR過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控的目的。并且可以通過(guò)數(shù)據(jù)分析計(jì)算出起始模板量,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來(lái)源。
RPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞、正?;驉盒栽錾陌准?xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。
懸浮培養(yǎng)指的是一種在受到不斷攪動(dòng)或搖動(dòng)的液體培養(yǎng)基里,培養(yǎng)單細(xì)胞及小細(xì)胞團(tuán)的組織培養(yǎng)系統(tǒng)
流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,F(xiàn)CM)是一種綜合應(yīng)用光學(xué)、機(jī)械學(xué)、流體力學(xué)、電子計(jì)算機(jī)、細(xì)胞生物學(xué)、分子免疫學(xué)等學(xué)科技術(shù),使被測(cè)溶液流經(jīng)測(cè)量區(qū)域,并逐一檢測(cè)其中每一個(gè)細(xì)胞的物理和化學(xué)特性,從而對(duì)高速流動(dòng)的細(xì)胞或亞細(xì)胞進(jìn)行快速定量測(cè)定和分析的方法。