進(jìn)入核酸分子,形成異常RNA或DNA,影響核酸的功能并導(dǎo)致突變。5-氟尿嘧啶類似尿嘧啶,可進(jìn)入RNA,與腺嘌呤配對(duì)或異構(gòu)成烯醇式與鳥嘌呤配對(duì),使A-T對(duì)轉(zhuǎn)變?yōu)镚-C對(duì)。因?yàn)檎<?xì)胞可將其分解,而癌細(xì)胞不能,所以可選擇性抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)。
提質(zhì)粒是分子生物學(xué)中基本,easy的實(shí)驗(yàn)。完全不需要借助大腦,直接照著提取試劑盒中的操作說明傻瓜操作即可(其實(shí)應(yīng)該由機(jī)器人在實(shí)驗(yàn)室中操作這些簡(jiǎn)單卻耗時(shí)的實(shí)驗(yàn))。盡管操作簡(jiǎn)單,提質(zhì)粒卻也是一個(gè)比較重要的步驟,提出質(zhì)粒的質(zhì)量和數(shù)量將直接決定著后續(xù)實(shí)驗(yàn)室的成敗。當(dāng)我們按照試劑盒中操作說明進(jìn)行操作時(shí),我們會(huì)看到P1,P2,N3, PE,EB等不同的溶液(不同試劑盒可能標(biāo)識(shí)不同)。那么大家是否知道每瓶溶液中裝的什么?它們?cè)谫|(zhì)粒提取過程中的作用又是怎樣的?
pH值,亦稱氫離子濃度指數(shù)、酸堿值,是溶液中氫離子活度的一種標(biāo)度,也就是通常意義上溶液酸堿程度的衡量標(biāo)準(zhǔn)。這個(gè)概念是1909年由丹麥生物化學(xué)家S?ren Peter Lauritz S?rensen提出。p代表德語Potenz,意思是力量或濃度,H代表氫離子(H)。有時(shí)候pH也被寫為拉丁文形式的pondus hydrogenii。
培養(yǎng)基與菌種分離是從含有多種微生物的樣品中獲得純種微生物的操作技術(shù)。菌種分離主要在培養(yǎng)皿上進(jìn)行,常用的方法是稀釋法和劃線法。使用這兩種方法的目的是是微生物的一個(gè)個(gè)體通過繁殖,在固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出肉眼能見的群體,根據(jù)培養(yǎng)特征,用接種針調(diào)取所需菌種并在顯微鏡下檢查,證明為單一形狀的菌體。常用的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基。
抽提方法的優(yōu)化。基于苯酚的方法的最大問題是分層不徹底和部分 RNA 的丟失(不能全部將上清取出)。分層不徹底是因?yàn)楹怂岷偷鞍踪|(zhì)含量高,可以用增加裂解液使用量或者降低樣品量解決。脂肪組織要增加一步氯仿抽提。RNA 的丟失可以用反抽方法或者去除有機(jī)層后再離心的方法降低?;谥x心式方法的最大問題是樣品過量。
B淋巴細(xì)胞在抗原的刺激下,能夠分化、增殖形成具有針對(duì)這種抗原分泌特異性抗體的能力、B細(xì)胞的這種能力和量是有限的,不可能持續(xù)分化增殖下去,因此產(chǎn)生免疫球蛋白的能力也是極其微小的、將這種B細(xì)胞與非分泌型的骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)一步克隆化,這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞是既具有瘤的無限生長(zhǎng)的能力,又具有產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞的能力,將這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)或注入小鼠體內(nèi)即可獲得大量的高效價(jià)、單一的特異性抗體.這種技術(shù)即稱為單克隆抗體技術(shù)。
微生物定性檢驗(yàn)的專屬性是指檢測(cè)樣品中可能存在的特定微生物種類的能力。當(dāng)替代方法以微生物生長(zhǎng)作為判斷微生物是否存在時(shí),其專屬性驗(yàn)證時(shí)應(yīng)確認(rèn)所用培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)試驗(yàn),還應(yīng)考慮樣品的存在對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響。當(dāng)替代方法不是以微生物生長(zhǎng)作為判斷指標(biāo)時(shí),其專屬性驗(yàn)證應(yīng)確認(rèn)檢測(cè)系統(tǒng)中的外來成分不得干擾試驗(yàn)而影響結(jié)果,如確認(rèn)樣品的存在不會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響。采用替代方法進(jìn)行控制菌的檢驗(yàn),還應(yīng)選擇與控制菌具有類似特性的菌株作為驗(yàn)證對(duì)象。